BIOPELICULAS Y ELISA

Trato de estandarizar un protocolo para estimar la produccion de biopeliculas en Placas de microtitulacion de Poliestireno. he usado cristal violeta al 0.1%, 1% y fucsina básica 3% y extraido el biofilm con etanol/acetona (90:10) y segun mi bibliografia la lectura a 492 con referencia a 630. mi pregunta es... como debo entender esa observacion técnica. pues mis lecturas a esas condiciones son muy bajas y solo tienen coherencia con fuscina y no con cristal violeta. tenemos un lector modelo ER 500 SINNOWA.
agradeceré su apoyo tbm al correo f86red@hotmail.com

Todo método analitico requiere ser normalizado

La mejor manera de normalizar es hcer una curva de calibracion.
Toma placas de distintas superficies(y conocidas)y sobre ella generas la biopelicula. Una vez formada la raspes toda, para secarla y finalmente pesar la masa total de biomasa.

A una replica de la placa de PS con la misma superficie le aplicas la técnica que describiste con los colorantes. Mides DO y datos los graficas asi: En el eje X mg de biomasa y en el eje Y la DO a la longtud de onda que decidas leer. Debe dar una recta que servira para estimar mediante colorimetria los mg de biomasa presentes en la pelicula. saludos Los reultados mandamelos a ricvdu@gmail.com