Los valores obtenidos para 125% del normal son de 51.30, 49.30, 42.20, 35.80, 28.50; con una media de 42.78, una DS de 8.09, casi el doble de dispersión del método original, el coeficiente de regresión es de 34.22 y la sensibilidad del método en esa zona de 4.23.

El coeficiente de variación es la inversa de la sensibilidad del método y es 15.1% para el punto 125%, de 8.30% para el punto 100% ó 1:1; de 13.6% para el punto 50% ó 1:2; de 8.50% para el punto 33.33% ó 1:3; de 46.3% para el punto 25% ó 1:4.

Valores de alrededor de 5% del coeficiente de variación entre dos puntos, o menores, nos habla de la linealidad del método entre los mismos, por lo que en nuestro caso el método sería lineal hasta la dilución 1:3 inclusive, es decir para FP3 time de hasta 79.06 más menos 3 x 2.25 segundos aproximadamente, es decir 85.81 segundos que sería el límite máximo para el 33.33% del normal. Valores superiores de FP3 time requerirán la comparación con estándares de concentraciones más bajas.

Como a hemos dicho, el intervalo de referencia para las muestras no patológicas vendría dado por la media del punto 1:1 más menos 3 DS, es decir 44.9 mas menos 11.9, o sea de 33.7 a 56.8, que coincide con los valores de referencia no patológicos del KPTT, que es un FP3-time no autólogo.
Otros autores han medido la disponibilidad de PF3 en PRP ajustado a 200 x103/µl plaquetas, según la técnica de Hardisty RM et al. El rango normal se calculó con el PRP obtenido de 62 controles sanos tomados al azar de los donantes de un banco de sangre y fue de 33 ± 4 segundos. 14

El coeficiente de correlación lineal es un índice estadístico que mide la relación lineal entre dos variables cuantitativas. Los valores que se obtienen del mismo varían entre menos 1 y más 1. Cuando tal coeficiente es igual a cero las 2 variables x e y, son independientes entre sí. Cuando es igual a más 1 la correlación entre las variables es perfectamente directa, y cuando es igual a menos 1 es perfectamente inversa. El coeficiente de correlación lineal para nuestro método es de -0.936, es decir que las variables tienen una correlación cuasi lineal inversa, cuando la x sube la y disminuye, cuando la x baja la y aumenta. El coeficiente de regresión es la pendiente de la línea recta que relaciona más estrechamente dos variables correlacionadas. Indica el número de unidades en que se modifica la variable dependiente “Y” por efecto del cambio de la variable independiente “X” o viceversa en una unidad de medida. El coeficiente de regresión puede ser: Positivo, Negativo y Nulo. Es positivo cuando las variaciones de la variable independiente X son directamente proporcionales a las variaciones de la variable dependiente “Y” Es negativo, cuando las variaciones de la variable independiente “X” son inversamente proporcionales a las variaciones de Y. Es nulo cuando ninguna ley química física y matemática correlaciona ambas variables. El coeficiente de regresión en nuestra curva es de – 0.76, lo que significa que cuando la concentración de FP3 aumenta al doble, por ejemplo, la lectura del aparato en segundos baja 1.52 veces.

3- Precisión: Refleja la medida en que los valores de una serie repetida de ensayos analíticos que se realizan sobre una muestra homogénea son semejantes entre sí, y es una expresión de la reproducibilidad del método. Refleja, en definitiva, el error aleatorio.

Debe efectuarse sobre muestras homogéneas, es decir, sobre una misma muestra, pero de distintas concentraciones a los fines de evaluar si el método es preciso en todo el rango de medidas.
Se trabaja con una muestra de concentración baja, otra media y otra alta. Si el método se mantiene preciso a distintas dosis se concluye que la concentración de la muestra no influye en la determinación.
Generalmente se efectúa una evaluación intraensayo y otro interensayos, sobre un número de muestras n=10 en cada caso.

A medida que aumenta la concentración del analito se obtiene mayor DS y menor CV, esto es debido a que el coeficiente de variación es un cociente entre la desviación estándar y la media de las medidas, por lo que a mayores concentraciones y mayores valores de la media disminuye el CV.

La DS y el CV intraensayo es menor a la DS y el CV interensayos. En el primero, según hemos dicho, una misma muestra se procesa diez veces en la misma corrida, es decir, en similares condiciones del ensayo; en el segundo se procesan 10 alícuotas de una misma muestra en distintas corridas. En general se admite que DS arroje valores menores a 5.00 en la zona de concentraciones fisiológicas, y de 10 en zonas de concentraciones 3 o 4 veces superior, intraensayo: o DS de 10 y de 30, respectivamente, en la evaluación del comportamiento interensayos. El cumplimiento de tales parámetros validarían el ensayo.

En niveles fisiológicos de FP3 hemos obtenido los siguientes valores: 53.05; 49.09; 48.22; 47.33; 44.69; 44.26; 43.83; 39.87; 39.42 segundos; con una media de 45.36, una DS de 4.17, y un CV del 9%.
En niveles bajos del analito, correspondientes a diluciones 1:8 hemos obtenido los siguientes valores: 259.8 ; 322.9 ; 348.4 ; es decir con una media de 310.37, una DS de 45.61 y un CV del 15%, con una gran dispersión el método dejaría de ser preciso en esta zona de la curva dosis-respuesta. Esto era de esperar pues estaríamos en valores ocho veces inferiores a los fisiológicos, del orden del 12% de los mismos, mientras que la mayoría de los métodos se validan para concentraciones de entre 50 y 150% del valor fisiológico.

En la dilución 1:4, correspondiente al 25% del valor fisiológico hemos obtenido los siguientes valores: 165.4; 187.9; y 110.2; con una DS de 39.98 y un CV del 26%, también alto.

En la dilución 1:2, correspondiente al 50% de los valores fisiológicos la DS obtenida es de 1.54
En la dilución 1:3, correspondiente al 33.33% de los valores fisiológicos se obtiene una DS de 8.63 y un CV del 12%, que resulta inferior a la DS de 10 y de 30, requerido en las zonas patológicas, intraensayo e interensayo, respectivamente.

El método resultaría validado para concentraciones de alrededor de 1:3 de las fisiológicas, es decir, para valores de FP3-time de hasta 85.81 segundos, tal cual lo hemos obtenido al estudiar la linealidad.
El método es muy robusto si tenemos en cuenta que el 33.33% de los valores fisiológicos de los niveles de colesterol sérico, por ejemplo, rondarían los 66.66 mg/dl, que es un valor comparable con la fracción correspondiente al colesterol bueno o HDL. Las determinaciones de colesterol de la HDL efectuadas por el método enzimático convencional de colesterol total sobre el sobrenadante de una precipitación selectiva, requiere de 5 veces más muestra que el método original para ser lo necesariamente sensible y exacto. Mientras que el método coagulométrico de determinación de FP3 resulta validado en esos niveles sin alterar la cantidad de plasma empleada en la determinación.

La precisión en el punto correspondiente a 150% de la media normal se efectuó con el agregado de 30 microlitros de FP3 exógeno al sistema de 300 microlitros de PRP más 30 microlitros de caolín, y se obtuvieron los siguientes valores: 47.89 , 45.14 , 9.55, 3.85, 42.94 y 40.37, con algunos valores muy discordantes, con una media de 31.62

3- Exactitud: Indica la capacidad del método analítico para obtener resultados lo más próximo posibles al valor verdadero, y es una medida del error sistemático. Para asegurar una buena exactitud es necesario eliminar los errores referidos al funcionamiento y calibración de los equipos de lectura, los errores inherentes al blanco de reactivos, y los que dependen de la cantidad de analito presente.

La mejor manera de identificar los errores sistemáticos y la exactitud del método son los controles de calidad interlaboratoriales o en su defecto intralaboratoriales pero con referencia a otro método de calidad reconocida.

En el caso que nos ocupa, la calibración del autoanalizador se realiza de manera automática antes de cada corrida diaria.