Pruebas de Graham: se utiliza para el diagnóstico de Oxiuros generalmente aquellos que pertenecen al género Enterobius vermicularis.

Se utiliza una cinta de celofán, que se sujeta con un depresor y se pasa por la zona perianal a primera hora de la mañana y sin aseo previo. Colocamos la cinta sobre un porta y examinamos en busca de huevos.

Técnica para buscar quistes de Criptosporidium: se trata de una tinción AAR modificada, que consiste en:

Fijar con Metanol durante 30 minutos
Añadir Carbol Fucsina durante 5 minutos
Lavar con Etanol a 50ºC
Lavar con agua
Decolorar con Ácido Sulfúrico al 1% durante 2 minutos.
Añadir Azul de Metileno

Los quistes se observarán de color rojo-rosa sobre fondo azul.

Técnica para la búsqueda de proglótides de cestodos (segmentos del cuerpo de gusanos): Se utiliza para diferenciar entre las especies de Tenia solium y Tenia saginata.

Prueba de cápsulas duodenales o enterotest: Esta prueba se utiliza para la investigación de Giardia y Strongyloides. Consiste en hacer pasar un hilo de nylon con un peso por el intestino y posteriormente, cuando el hilo es eliminado, se raspa para la examinación.

Tinción Tricrómica: Esta prueba es más concentrada que las tinciones tricrómicas que habitualmente se realizan. Se utiliza para la investigación de Microsporidium.

Cuantificación de huevos: se utiliza para la investigación de Áscaris lumbricoides y Trichuris trichura. La prueba se lleva a cabo mediante el “Recuento de Stoll”:

Consiste en la realización de una suspensión con 4 gramos de heces. Se utiliza un asa calibrada de 0,15 mL. Los resultados se expresan como:

% huevos / gramo = nº huevos x 100 x Factor de Corrección

El Factor de Corrección se pone en función de la contextura de las heces, así, para heces diarreicas se utiliza un 3, para heces blandas un 2 y para semiformes un 1,5.

Observación de larvas de Nematodos / larvas de Strongyloides: se realiza una suspensión de heces no refrigeradas. Se pasan a un tubo de ensayo con papel de filtro y se deja reposar en el durante 10 días. Transcurrido el tiempo se retira el papel y se observa la presencia de larvas en la superficie del pape. 43

Detección Directa En Otras Muestras Distintas A Heces

Sangre: para el estudio del Paludismo, Filarias y Tripanosomas. Se pueden utilizar dos técnicas:

Capa fina: se realiza una extensión igual que para el frotis sanguíneo.

Gota gruesa: depositamos una gota en el centro de un porta y con el extremo de otro porta desfibrinamos la gota moviéndola como si la estuviéramos mezclando.

Esputo: se puede realizar un examen en fresco o tinciones permanentes. Podemos encontrar:

Fases larvarias de Áscaris, Strongyloides
Huevos de algunos gusanos
Amebas (excepcionalmente)
Criptosporidium

Exudados vaginales: se realiza un examen en fresco y se investiga la presencia de Tricomonas vaginalis.

Biopsias hepáticas, nódulos linfáticos y LCR

Pruebas serológicas y detección de Ag y técnicas de PCR (40).

Protozoos

Divisiones en función del medio de Locomoción

Sarcodina-Amebas

Mastigafora O Flagelados

Ciliata

Esporozoa

Sarcodina (Rizópodos) – Amebas

Las amebas se pueden clasificar en dos grandes grupos, según sean:

De vida libre: se dividen en Naegleria y Acantamoeba
Parásitos: se dividen en Entamoeba, Endolimax e Iodamoeba.

Las características generales de las amebas son:

Se multiplican por fisión binaria
Se desplazan mediante seudópodos
Presentan formas de resistencia (quistes)

La ameba más característica de todas las anteriores es la Entamoeba hystolítica, que es el agente etiológico de la disentería amebiana.

Esta ameba se presenta tanto en forma vegetativa (trofozoito) como en forma quística. Cada quiste da lugar a 8 amebas diferentes en función de la forma del quiste, etc.

La Transmisión es por vía fecal-oral a través de la ingestión de los quistes.

Produce lesiones necróticas en el colon y en ocasiones se producen manifestaciones sistémicas que se observan por la presencia de abscesos hepáticos.

El Diagnóstico consiste en la observación de las heces en fresco para la detección de trofozoitos y quistes.

Los quistes se producen por deshidratación del contenido intestinal pasando luego de la forma vegetativa a la forma quística. Los quistes pueden ser:

Inmaduros: se observan como cuerpos cromatoides (cromatina) con cúmulos de glucógeno que se tiñen con lugol de amarillo.